什么是【新冠病毒诊疗方案(第六版)】中提到的多重pcr?宁波海尔施基因科技有限公司-九游会登录网址

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什么是【新冠病毒诊疗方案(第六版)】中提到的多重pcr?
2020-02-22

《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案(试行第六版)》(国卫办医函[2020]145号)表明,鉴别诊断,尤其是通过多重pcr核酸检测,在新冠肺炎诊疗中具有非常重要的临床意义:





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什么是多重pcr?



多重pcr在常规pcr基础上改进并发展起来的一种新型pcr扩增技术,即可在一个反应体系中加入两对以上引物,同时扩增出多个核酸片段。多重pcr的技术难点在于:1)平衡各对引物的扩增效率;2)pcr产物的检测方式。常见的产物检测手段有:多通道荧光信号检测、熔解曲线法、毛细电泳片段分析方法、质谱法、高通量测序法等。如下图



多重pcr核酸检测示意图


呼吸道病毒多重pcr核酸检测是在一个反应管内加入多种呼吸道病毒的特异性引物,在短时间内同时检测多种病原体,实现对呼吸道病毒早期、快速、准确诊断。
2019年11月15日,国家药品监督管理局发布《呼吸道病毒多重核酸检测试剂技术审查指导原则》(2019年第80号)指出检测八种常见呼吸道病毒甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒、人偏肺病毒、腺病毒、呼吸道感染肠道病毒(肠道病毒/鼻病毒)、冠状病毒。这些病毒临床表现与新型冠状病毒肺炎有相似之处,难以通过临床表现、胸部影像学鉴别,需要通过多种pcr核酸检测等病原学检查手段鉴别。


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多重pcr的优点




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相比于普通pcr,多重pcr的优点:

1)高效性。
2)内部质控。
3)样本质控。

1)高效性。为了同时检测多个靶标,普通pcr往往使用多管。与多管普通pcr相比,多重pcr试剂的准备时间要少,节省昂贵的聚合酶和模板,可以实现管内对多个靶点进行检测(如下图),并能充分利用96孔pcr板的空间,实现一次94个样本的高通量检测(需1个阳性对照和1个阴性对照)。

2)内部质控。在多重pcr中加入反应内参,可以为其他扩增片段提供内部对照,内参与样本同管同步,可以真正反映样本检测结果的可靠性。在普通pcr中,内参与样本在不同管中进行扩增检测,因此内参的结果往往只能反映该管的pcr扩增情况。

3)样本质控。普通pcr一般仅包含ic质控,主要用于监控实验过程,样本质量问题导致的假阴性无法监测到。多重pcr,由于其强大的拓展性,可以设置多个质控,除监控实验的ic质控外,还可设置监控样本质量的质控,为结果的准确性提供质量保障,大大降低假阴性概率。因此,与普通pcr相比,多重pcr 反应的样本质控可以更有效地评估模板的质量,以毛细电泳片段分析法为例(hurna为人rna质控,hudna为人dna质控,ic为ic质控):


三个质控正常。结果报告:呼吸道合胞病毒阳性


仅ic质控正常,表明实验操作正常,但样本取样失败或样本保存不当,不能发送阴性报告


无人rna内参,表明实验操作正常,但样本保存不当导致rna降解,不能发送阴性报告



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睿司倍®唯一一款获证呼吸道病原体多重pcr产品


宁波海尔施基因科技有限公司研发生产的“13种呼吸道病原体多重检测试剂盒(pcr毛细电泳片段分析法,国械注准20183400518)”,检测病原种类包含:1)国家药品监督管理局发布的《呼吸道病毒多重核酸检测试剂技术审查指导原则》建议的八种常见呼吸道病毒;2)《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案(试行第六版)》鉴别诊断强调的病毒和肺炎支原体;它是唯一满足《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案(试行第六版)》鉴别诊断要求且具有nmpa注册证的多重pcr核酸检测试剂,可为新型冠状病毒感染的鉴别诊断提供全面、高质量的病原体检查结果,有利于疫情的防控和临床诊治。

宁波海尔施基因科技有限公司:     

宁波海尔施基因科技有限公司(hgt),成立于2011年8月,主营核酸(基因)分析、分子诊断类产品的研发、生产、销售及应用服务。

秉承“让社会更安全·让生活更健康”的理念,依托独具优势的新一代片段分析方法(advanced fragment analysis,afa),致力于自主研发和生产具有国际领先水平的核酸分子检测产品,为个体识别、亲缘鉴定、感染性病原体检测和个体化用药指导提供卓越的分子检测方案。

欢迎垂询,服务热线:0574-27978799

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